Описание
Содержание
Введение
1. Предыстория развития методов секвенирования
2. Обзор методов секвенирования
2.1 Секвенирование ДНК по Сэнгеру: «плюс-минус» метод
2.2 Секвенирование ДНК по Сэнгеру: метод «терминаторов»
2.3 Секвенирование ДНК по Максаму и Гилберту: метод химической деградации
2.4 Автоматическое секвенирование ДНК
3. Свойства флуорофоров и полимераз, используемых в секвенировании ДНК
3.1 Флуоресцентные красители
3.2 Полимеразы, используемые при секвенировании ДНК
4. Особенности секвенирующего гель- электрофореза и существующие типы секвенаторов
4.1 Секвенирующий гель и электрофорез
4.2 Секвенаторы
Заключение
Библиографический список
Приложения
22 стр.
Фрагмент
Введение
В настоящее время остро встает вопрос о практической реализации фундаментальных разработок в области молекулярной биологии, медицины и фармакологии, например, методов секвенирования (расшифровки) нуклеотидных последовательностей ДНК.
Теоретически процесс секвенирования не представляет сложности, так как все аминокислоты, встречающиеся в природных белках, имеют разные свойства. Поэтому, когда был расшифрован генетический код, появилась возможность восстанавливать нуклеотидную последовательность транскрибируемой ДНК по аминокислотной последовательности соответствующего белка. Однако, генетический код является вырожденным. Следовательно, первичная структура ДНК, полученная на основе анализа последовательности аминокислот, не является однозначной [12].
Кроме того, для эукариот таким способом можно восстановить лишь нуклеотидный состав экзонов, тогда как информация о составе интронов теряется в результате сплайсинга.
В настоящее время на уровне академических центров, различных НИИ России, стран СНГ, Западной Европы, США и Канады развиваются и внедряются в практику результаты научных разработок в области секвенирования. В России проводятся исследования, направленные на изучение молекулярных основ биологических процессов. Также формируются методологические исследования, направленные на оптимизацию процессов секвенирования.
В свете вышеизложенного актуальность данной работы не вызывает сомнений и состоит в изучении литературы и интернет — ресурсов по вопросу изучения методов секвенирования нуклеотидных последовательностей ДНК.
В этой связи основная цель аналитического обзора литературы – сориентироваться в вопросах развития и прикладного применения методов секвенирования нуклеотидных последовательностей ДНК.
